Bestimmung der Anzahl der Mikroorganismen – mikroskopische Direktzählmethode!
Grundlegend
Bei der mikroskopischen Direktzählmethode handelt es sich um eine einfache, schnelle und intuitive Methode, bei der eine kleine Menge der Suspension der zu testenden Probe auf einen speziellen Glasobjektträger (auch als Bakterienzähler bekannt) mit einer bestimmten Fläche und einem bestimmten Volumen gegeben und direkt darunter gezählt wird ein Mikroskop. Zu den derzeit im In- und Ausland am häufigsten verwendeten Bakterienzählern gehören: Blutzellenzähltafel, Peteroff-Hauser-Bakterienzähler und Hawksley-Bakterienzähler usw. Sie können alle zum Zählen von Suspensionen wie Hefe, Bakterien und Schimmelpilzsporen usw. verwendet werden Die Grundprinzipien sind die gleichen. Die beiden letztgenannten Bakterienzähler haben ein Gesamtvolumen von 0,02 mm3, nachdem sie mit einem Deckglas abgedeckt wurden, und der Abstand zwischen Deckglas und Objektträger beträgt nur 0,02 mm, sodass kleine Zellen wie z Bakterien können mit einem Ölimmersionsobjektiv beobachtet und gezählt werden. Neben der Verwendung dieser Bakterienzähler gibt es auch eine Schätzmethode, bei der das Verhältnis der Abstrichfläche zur Gesichtsfeldfläche direkt unter dem Mikroskop beobachtet wird. Diese Methode wird im Allgemeinen zur bakteriologischen Untersuchung von Milch verwendet. Der Vorteil der Mikroskop-Direktzählmethode besteht darin, dass sie intuitiv, schnell und einfach zu bedienen ist. Der Nachteil dieser Methode besteht jedoch darin, dass es sich bei den Messergebnissen meist um die Summe toter und lebender Bakterien handelt. Gegenwärtig gibt es einige Methoden, um diesen Mangel zu beheben, z. B. die Kombination lebender Bakterien, die eine Mikrokammerkultur (kurze Zeit) färben, und die Zugabe von Zellteilungshemmern, um das Ziel zu erreichen, nur lebende Bakterien zu zählen.
In diesem Experiment wurde ein Hämozytometer als Beispiel verwendet, um eine direkte Zählung unter einem Mikroskop durchzuführen. Die Verwendungsmethoden der anderen beiden Bakterienzähler entnehmen Sie bitte den Anweisungen der jeweiligen Hersteller. Die direkte Zählung unter dem Mikroskop mit einem Hämozytometer ist eine häufig verwendete Methode zur Keimzählung. Das Zählbrett ist eine speziell angefertigte Glasrutsche, auf der vier Schlitze drei Plattformen bilden; Die breitere Plattform in der Mitte ist durch einen kurzen horizontalen Schlitz in zwei Hälften geteilt, und jede Seite der Plattform ist mit einem Gitter ausgekleidet. Jedes Gitter ist in neun große Quadrate unterteilt, und das mittlere große Quadrat ist die Zählkammer. Die Skala des Zählraums hat im Allgemeinen zwei Spezifikationen: Eine besteht darin, dass ein großes Quadrat in 25 mittlere Quadrate unterteilt ist und jedes mittlere Quadrat in 16 kleine Quadrate unterteilt ist. Das andere ist, dass ein großes Quadrat in 16 mittlere Quadrate unterteilt ist und jedes mittlere Quadrat in 25 kleine Quadrate unterteilt ist, aber unabhängig von der Art des Zählbretts gibt es 400 kleine Quadrate jedes große Quadrat. Die Seitenlänge jedes großen Quadrats beträgt 1 mm, und die Fläche jedes großen Quadrats beträgt 1 mm 2. Nachdem das Deckglas bedeckt ist, beträgt die Höhe zwischen dem Deckglas und dem Objektträgerglas 0,1 mm, also das Volumen des Die Größe der Zählkammer beträgt 0,1 mm (ein Zehntausendstel Milliliter).
