Technische Parameter des Konfokalmikroskops
1 Auflösung
Die Systempunktverteilungsfunktionsverteilung des konfokalen Mikroskops ist gleich der Faltung der Objektivlinse und der Punktbildenergieverteilung. Bei derselben Objektivlinse ist ihre laterale Auflösung (xy-Ebene) 1,4-mal höher als die herkömmlicher optischer Mikroskope und erreicht 0,4λ/NA. Beispielsweise beträgt die Auflösung des TcS-NT von Leica 0,18 μm. Aus dem Prinzip des konfokalen Mikroskops wissen wir, dass die Einstellung der Lochblende am Detektor nicht nur die Interferenz des unscharfen Punktbildes mit dem Bild der Detektionsebene effektiv unterdrückt, sondern auch die Interferenz der Nicht-Detektion unterdrückt Punkt auf der Quasi-Fokusebene zum Erfassungspunkt, was die Bildauflösung erheblich verbessert. Um eine extreme Auflösung zu erreichen, müssen konfokale Mikroskopsysteme außerdem mit einem vibrationsfesten Tisch ausgestattet sein.
2 Empfindlichkeit
Herkömmliche optische Mikroskope sind häufig mit CCD-Kameras zum Sammeln von Bildern ausgestattet. Aufgrund der relativ geringen Empfindlichkeit von CCDs kann Licht mit geringer Beleuchtungsstärke wie Fluoreszenz jedoch nicht erkannt werden. Daher werden in konfokalen Mikroskopsystemen im Allgemeinen Photovervielfacherröhren als Detektionselemente verwendet. Viel mehr als CCD kann es auch eine hohe Empfindlichkeit gegenüber schwachen Fluoreszenzsignalen zeigen.
3 Horizontale Auflösung
Konfokale Mikroskopiesysteme zeigen in vergrößerten Bildern mehr Details als herkömmliche Lichtmikroskopie. Die hier erwähnte Vergrößerung bezieht sich nicht auf die physikalische Vergrößerung, sondern auf die morphologischen Details des Bildes, das vom konfokalen Mikroskop unter der gleichen Vergrößerungsbedingung der Objektivlinse angezeigt wird und unter dem herkömmlichen optischen Mikroskop schwer zu erkennen ist, so dass das Bild so ist klarer und subtiler. Die horizontale Auflösung ist höher.
4 Kontrast
Da das Objektbeleuchtungslicht im Scan nur einen sehr kleinen fokussierten Lichtpunkt darstellt und die Helligkeit und das Signal-Rausch-Verhältnis hoch sind, ist das Signallicht stärker als an anderen Punkten des Objekts. Auf der Bildebene kann der Punktdetektor nur Licht empfangen, das durch die Lochblende geht, während Streulicht aus anderen Teilen des Objekts herausgefiltert wird, da es nicht auf die konfokale Lochblende fokussiert werden kann. Dies führt zu kontrastreicheren Bildern von Proben, die mit konfokalen Rastermikroskopen erhalten werden als mit herkömmlichen Mikroskopen.
