Was sind die Unterschiede zwischen Fluoreszenzmikroskopie und inverser Mikroskopie?
Das Mikroskop ist ein wichtiges Instrument in der Zellkultur und damit verbundenen abgeleiteten Experimenten. Derzeit gibt es verschiedene Arten von Mikroskopen auf dem Markt, und die Auswahl eines Mikroskops, das den Anforderungen entspricht und geeignet ist, ist eine Herausforderung. Im Folgenden stellen wir die Prinzipien von inversen Mikroskopen und Fluoreszenzmikroskopen vor, aus denen jeder wählen kann.
Das inverse Mikroskop besteht wie ein normales Mikroskop hauptsächlich aus drei Teilen: mechanischem Teil, Beleuchtungsteil und optischem Teil.
Der Aufbau eines inversen Mikroskops ist der gleiche wie der eines normalen aufrechten Mikroskops, mit der Ausnahme, dass die Objektivlinse und das Beleuchtungssystem umgekehrt sind, wobei ersteres unter dem Tisch und letzteres über dem Tisch liegt.
Dieser Aufbau vergrößert den effektiven Abstand zwischen dem Beleuchtungsstrahlersystem und der Bühne erheblich und erleichtert so die Platzierung dickerer Beobachtungsgeräte wie Kulturschalen und Zellkulturflaschen (selbstverständlich können auch Glasobjektträger verwendet werden), während der Arbeitsabstand zwischen den Das Objektiv und das Material müssen nicht sehr groß sein.
Inverse Mikroskope werden von medizinischen und gesundheitlichen Einrichtungen, Universitäten und Forschungsinstituten zur Beobachtung von Mikroorganismen, Zellen, Bakterien, Gewebekulturen, Suspensionen, Sedimenten usw. verwendet. Es kann den Prozess der Zell- und Bakterienproliferation und -teilung im Kulturmedium kontinuierlich beobachten kann jede Form dieses Prozesses erfassen.
Weit verbreitet in Bereichen wie Zytologie, Parasitologie, Onkologie, Immunologie, Gentechnik, industrielle Mikrobiologie und Botanik.
Mithilfe der Fluoreszenzmikroskopie werden die Absorption, der Transport, die Verteilung und die Lokalisierung von Substanzen innerhalb von Zellen untersucht.
Für das getestete Objekt gibt es zwei Möglichkeiten, Fluoreszenz zu erzeugen: spontane Fluoreszenz, die direkt durch ultraviolette Strahlung emittiert wird; Sekundäre Fluoreszenz tritt auf, wenn das beobachtete Objekt mit fluoreszierenden Farbstoffen behandelt und ultraviolettem Licht ausgesetzt wird, bevor es Fluoreszenz emittiert.
Einige Substanzen in Zellen, wie zum Beispiel Chlorophyll, erzeugen spontane Fluoreszenz, nachdem sie ultravioletter Strahlung ausgesetzt wurden; Einige Substanzen selbst emittieren möglicherweise keine Fluoreszenz, können aber bei Anfärbung mit fluoreszierenden Farbstoffen oder fluoreszierenden Antikörpern unter ultravioletter Strahlung auch sekundäre Fluoreszenz emittieren.
Ein Fluoreszenzmikroskop verwendet eine Punktlichtquelle mit hoher Lichtausbeute, um eine bestimmte Lichtwellenlänge (UV 365 nm oder UV-Blau 420 nm) durch ein Farbfiltersystem als Anregungslicht zu emittieren, das die fluoreszierenden Substanzen in der Probe zur Emission verschiedener Fluoreszenzfarben anregt. Anschließend erfolgt die Beobachtung durch Vergrößerung des Objektivs und des Okulars.
Auf diese Weise ist es auch bei schwacher Fluoreszenz gut erkennbar und vor stark kontrastreichen Hintergründen hochempfindlich. Es wird hauptsächlich zur Untersuchung der Zellstruktur, -funktion und der chemischen Zusammensetzung verwendet.
