Die Prinzipien und Strukturmerkmale von Fluoreszenzmikroskopen
Das Fluoreszenzmikroskop verwendet eine hocheffiziente Punktlichtquelle, um eine bestimmte Lichtwellenlänge (z. B. ultraviolettes Licht 3650 oder violettes blaues Licht 4200) durch ein Farbfiltersystem als Anregungslicht zu emittieren, das fluoreszierende Substanzen in der Probe zur Emission verschiedener Fluoreszenzfarben anregt, und beobachtet dann durch die Vergrößerung der Objektivlinse und des Okulars. Dadurch ist es auch bei schwacher Fluoreszenz vor starkem Hintergrund leicht zu erkennen und weist eine hohe Empfindlichkeit auf. Es wird hauptsächlich zur Untersuchung der Zellstruktur, -funktion und der chemischen Zusammensetzung verwendet. Die Grundstruktur eines Fluoreszenzmikroskops besteht aus einem normalen optischen Mikroskop und einigen Zubehörteilen wie einer Fluoreszenzlichtquelle, einem Anregungsfilter, einem zweifarbigen Strahlteiler und einem Sperrfilter. Die Fluoreszenzlichtquelle - verwendet normalerweise Ultra-Quecksilberhochdrucklampen (50–200 W), die Licht verschiedener Wellenlängen emittieren können, aber jede fluoreszierende Substanz hat eine Anregungslichtwellenlänge, die die stärkste Fluoreszenz erzeugt. Daher müssen Anregungsfilter (normalerweise ultraviolette, violette, blaue und grüne Anregungsfilter) hinzugefügt werden, um nur eine bestimmte Wellenlänge des Anregungslichts durchzulassen und die Probe zu bestrahlen, während alles andere Licht absorbiert wird. Nach der Bestrahlung mit Anregungslicht emittiert jede Substanz in sehr kurzer Zeit sichtbare Fluoreszenz mit einer Wellenlänge, die länger als die Bestrahlungswellenlänge ist. Fluoreszenz ist spezifisch und im Allgemeinen schwächer als Anregungslicht. Um spezifische Fluoreszenz zu beobachten, muss hinter der Objektivlinse ein Sperrfilter (oder Unterdrückungsfilter) angebracht werden.
Es hat zwei Funktionen: erstens, das Anregungslicht zu absorbieren und daran zu hindern, in das Okular einzudringen, um eine Störung der Fluoreszenz und eine Schädigung der Augen zu vermeiden; Zweitens, um eine bestimmte Fluoreszenz auszuwählen und durchzulassen, die eine bestimmte Fluoreszenzfarbe zeigt. Es müssen zwei Arten von Filtern kombiniert verwendet werden.
