Der richtige Einsatz der inversen Fluoreszenzmikroskopie
Das inverse Fluoreszenzmikroskop ist ein multifunktionales Mikroskop, das im Bereich der biologischen Spitzenforschung eingesetzt wird. Sein Aufbau ist komplex und teuer. Damit Medizinstudenten die Funktionsweise und Nutzungsstandards des inversen Fluoreszenzmikroskops richtig beherrschen, müssen die Lehrer daher zunächst die Grundkenntnisse des inversen Fluoreszenzmikroskops vermitteln, bevor sie die tatsächliche Funktionsweise des inversen Fluoreszenzmikroskops demonstrieren. Sie sollten die Struktur, das Prinzip, die Funktion und die grundlegenden Verwendungsmethoden des inversen Fluoreszenzmikroskops vorstellen und dann verschiedene Funktionen für verschiedene Proben in bestimmten Verwendungsvorgängen demonstrieren, um die Bedienung und Verwendung des inversen Fluoreszenzmikroskops schrittweise für Medizinstudenten zu standardisieren.
1. Richtiger Einsatz der visuellen Beobachtung. Eine der Funktionen eines inversen Fluoreszenzmikroskops besteht darin, in einem hellen Sichtfeld zu beobachten. Sein Grundprinzip besteht darin, eine Abbildung vor einem hellen Hintergrund zu erreichen, basierend auf der unterschiedlichen Lichtabsorption jedes Teils der Probe nach der Beleuchtung mit Licht. Es eignet sich hauptsächlich zur Beobachtung gefärbter oder gefärbter Zellen, Gewebeschnitte und anderer Proben.
2. Richtiger Einsatz der Differentialbeobachtung. Die zweite Funktion des inversen Fluoreszenzmikroskops ist die Beobachtung der Phasendifferenz. Sein Grundprinzip besteht darin, die optische Wegdifferenz verschiedener Teile der Probe in Amplitudendifferenz umzuwandeln und durch ein Phasendifferenzobjektiv mit einer Phasenplatte und einem Scheinwerfer mit kreisförmiger Apertur zu beobachten. Es eignet sich hauptsächlich zur Beobachtung lebender Zellen oder ungefärbter Gewebeschnitte. Im Prozess des experimentellen Unterrichts ist es neben der korrekten Anleitung von Medizinstudierenden, die grundlegenden Arbeitsmethoden der Phasendifferenzbeobachtung zu befolgen, wichtiger, sie anzuleiten, die Proben mithilfe der Phasendifferenzbeobachtung zu verstehen und zu beherrschen. Für sie ist die mikroskopische Beobachtung kultivierter Zellen die am häufigsten verwendete Methode in der zukünftigen wissenschaftlichen Forschung. Erstens wird für die Auswahl der Zellausrüstung grundsätzlich empfohlen, Kulturschalen, Platten und Flaschen aus Glas und Kunststoff zu verwenden. Sie sind größtenteils farblos und transparent und können direkt unter einem inversen Fluoreszenzmikroskop beobachtet werden, ohne dass Zellflüssigkeit ausgegossen oder andere Behandlungen durchgeführt werden müssen. Zweitens: Öffnen Sie während der mikroskopischen Beobachtung nicht zufällig den Deckel des Geräts, um eine Kontamination der Zellen zu vermeiden. Schließlich sollten die Bediener Handschuhe, Masken und weiße Kittel tragen, um nicht nur ihre eigene Gesundheit zu schützen, sondern auch eine Zellkontamination zu verhindern.
3. Korrekter Einsatz der Fluoreszenzbeobachtung. Die dritte Funktion eines inversen Fluoreszenzmikroskops ist die Fluoreszenzbeobachtung. Sein Grundprinzip besteht darin, die Probe mithilfe von Anregungslicht zur Erzeugung von Fluoreszenz anzuregen und so die Form und Positionierung der Probe zu beobachten. Es eignet sich hauptsächlich zur Beobachtung fluoreszenzmarkierter Proben. Die Fluoreszenzbeobachtung ist eine wichtige Funktion der inversen Fluoreszenzmikroskopie, mit teurem Zubehör und speziellem Einsatz. Damit Medizinstudierende die Arbeitsnormen der Fluoreszenzbeobachtung richtig beherrschen, bringen ihnen die Lehrer nicht nur die grundlegenden Arbeitsmethoden bei, sondern, was noch wichtiger ist, ihnen die Einzigartigkeit dieser Methoden bei. Erstens sollte bei der Probenvorbereitung die Oberfläche des Objektträgers und des Deckglases glatt und die Dicke angemessen sein (der Objektträger sollte zwischen 0,8 mm und 1,2 mm und das Deckglas etwa {{5} mm dick sein }}.17mm); Die Probe sollte eine angemessene Dicke haben und gleichzeitig Zellüberlappungen oder Verunreinigungsmaskierungen vermeiden. Das Versiegelungsmittel sollte eine gleiche Mischung aus Glycerin und Carbonatpuffer (0,5 mol/L pH 9,0-9,5) verwenden. Zweitens sollten vor der Fluoreszenzbeobachtung die Lichter im Raum und das weiße Licht des inversen Fluoreszenzmikroskops ausgeschaltet werden, um sicherzustellen, dass sie sich in einer dunklen Raumumgebung befinden. Schließlich sollte bei der Fluoreszenzbeobachtung die Beobachtungszeit streng kontrolliert werden, im Allgemeinen 1-2 Stunden pro Zeit, da sonst die Fluoreszenz abklingt und verschwindet; Beim Einstellen der Lichtquelle sollte eine Schutzbrille getragen werden, um UV-Schäden an der Brille zu vermeiden.
4. Richtige Verwendung der Bilderfassung. In der wissenschaftlichen Forschung ist es nicht nur erforderlich, dass mit der inversen Fluoreszenzmikroskopie mehrere Beobachtungen möglich sind, sondern auch, dass mit der inversen Fluoreszenzmikroskopie eine Bilderfassung möglich ist. Das inverse Fluoreszenzmikroskopsystem kombiniert ein optisches Mikroskop mit einem Computer durch photoelektrische Umwandlung und ermöglicht nicht nur die mikroskopische Beobachtung am Okular, sondern auch die dynamische Bildbeobachtung, -bearbeitung und -speicherung in Echtzeit auf dem Computer.
