Technische Parameter und Nutzungsfähigkeiten des Fluoreszenzmikroskops
Technische Parameter des Fluoreszenzmikroskops 1. Weitwinkelokular 2. Achromatische Objektivlinse 3. Vierloch-Objektivlinsenkonverter 4. Fallendes Fluoreszenzgerät Blau (B) Grün (G) Anregungssystem 100W Quecksilberlampe 5. Koaxial grob Mikrofokussierungsmechanismus: Fokussierbereich 15 mm. Mikrorasterwert 0,002 mm. 6. Längsbewegungsbereich der mechanischen Werkbank mit Doppelschicht: 70 mm. Seitlicher Bewegungsbereich: 50 mm
Technische Parameter des Fluoreszenzmikroskops
1. Weitwinkelokular
2. Achromatische Objektivlinse
3. Objektivkonverter mit vier Löchern
4. Fallendes Fluoreszenzgerät Blau (B) Grün (G) Anregungssystem 100 W Quecksilberlampe
Koaxialer grober Mikrofokussierungsmechanismus: Fokussierungsbereich: 15 mm, Mikrorasterwert: 0,002 mm
6. Doppelschichtige mechanische Werkbank
Bewegungsbereich in Längsrichtung: 70 mm Bewegungsbereich in Querrichtung: 50 mm
Tipps und Methoden zur Verwendung der Fluoreszenzmikroskopie
(1) Rutsche
Die Dicke des Objektträgers sollte zwischen 0,8 und 1,2 mm liegen. Ist der Objektträger zu dick, absorbiert er einerseits zu viel Licht und kann andererseits nicht dazu führen, dass sich Anregungslicht auf der Probe sammelt. Der Objektträger muss glatt und sauber sein, eine gleichmäßige Dicke aufweisen und keine nennenswerte spontane Fluoreszenz aufweisen. Manchmal werden Objektträger aus Quarzglas benötigt.
(2) Abdeckglas
Die Dicke des Deckglases beträgt etwa 0,17 mm und es ist glatt und sauber. Um die Anregung zu verstärken, können auch Interferenzdeckgläser verwendet werden. Hierbei handelt es sich um ein spezielles Deckglas, das mit mehreren Schichten von Substanzen (z. B. Magnesiumfluorid) beschichtet ist, die bei verschiedenen Lichtwellenlängen unterschiedliche Interferenzeffekte haben. Es ermöglicht einen reibungslosen Durchgang der Fluoreszenz und reflektiert gleichzeitig die Anregung, wodurch die Probe angeregt werden kann.
(3) Probe
Gewebeschnitte oder andere Proben sollten nicht zu dick sein. Sind sie beispielsweise zu dick, wird der Großteil des Anregungslichts im unteren Teil der Probe verbraucht, während der obere, direkt von der Objektivlinse beobachtete Teil nicht ausreichend angeregt wird. Darüber hinaus können Zellüberlappungen oder die Maskierung von Verunreinigungen die Beurteilung beeinträchtigen.
(4) Montagemittel
Glycerin wird üblicherweise als Bindemittel verwendet und muss frei von spontaner Fluoreszenz, farblos und transparent sein. Die Helligkeit der Fluoreszenz ist bei pH 8,5 bis 9,5 heller und es ist nicht einfach, schnell zu verblassen. Daher wird üblicherweise eine äquivalente Mischung aus Glycerin und 0,5 mol/l Carbonatpufferlösung mit einem pH-Wert von 9,0 bis 9,5 als Montagemittel verwendet.
(5) Spiegelöl
Im Allgemeinen ist es bei der Verwendung eines Dunkelfeld-Fluoreszenzmikroskops und eines Ölmikroskops zur Beobachtung von Proben erforderlich, Linsenöl zu verwenden. Am besten verwenden Sie ein spezielles nicht fluoreszierendes Linsenöl, das auch durch das oben genannte Glycerin ersetzt werden kann. Auch flüssiges Paraffin kann verwendet werden, allerdings ist der Brechungsindex niedrig, was einen leichten Einfluss auf die Bildqualität hat.
