Vor- und Nachteile der Multiphotonen-Laser-Scanning-Mikroskopie
Die Multiphotonen-Laser-Scanning-Mikroskopie ist eine experimentelle Methode, die auf der Technologie des Laser-Scanning-Mikroskops basiert und mehr **optische Schnittmöglichkeiten bei der 3D-Beobachtung bietet. Die Multiphotonen-Fluoreszenzanregungsmethode verwendet lange Wellenlängen von rotem oder nahinfrarotem Licht, um hochauflösende Fluoreszenzbilder von Proben zu erhalten, wobei aktive Proben nur minimal abgetötet werden. Daher eignet sie sich für die Abbildung lebender Zellen, insbesondere dicker lebender Gewebe wie Gehirnscheiben, Embryonen, ganzer Organe und sogar ganzer Organismen.
Die Vorteile sind wie folgt:
1, die Verwendung von rotem Licht oder Infrarotlicht Anregung, Lichtstreuung ist klein(die Zerstreuung vonkleinTeilchen und die Wellenlänge der vierten Potenz des inversen Verhältnisses).
2, erfordert kein Loch, kann mehr gestreute Photonen aus dem Abbildungsquerschnitt sammeln.
3. Das Loch kann nicht zwischen den gestreuten Photonen unterscheiden, die von der unscharfen Region oder dem Brennpunktbereich emittiert werden. Bei der Mehrphotonen-Tiefenbildgebung ist das Signal-Rausch-Verhältnis gut.
4. Bei der Einzelphotonenanregung wird ultraviolettes oder sichtbares Licht verwendet, damit der Strahl die Brennebene erreicht, bevor die Probe leicht absorbiert und gedämpft wird, und es ist nicht leicht, ihn tief anzuregen.
5. Bei der Beobachtung unter dem biologischen Mikroskop ist * die erste Überlegung, den aktiven Zustand des Organismus selbst nicht zu schädigen, um den Wasser-, Ionen-, Sauerstoff- und Nährstoffkreislauf aufrechtzuerhalten. Bei Lichtbeobachtungen müssen sowohl thermische als auch Photonenenergie in der Zelle verbleiben, ohne dass die Menge an Strahlung und Lichtenergie Schaden nimmt.
6. Mehrphotonenmikroskope haben auch viele Vorteile. Wie dreidimensionale Auflösung, Tiefeneindringung, Streueffizienz, Hintergrundlicht, Signal-Rausch-Verhältnis, Steuerung usw. gibt es bisherige Lasermikroskope nicht oder haben darüber hinaus unvergleichliche Eigenschaften.
Das Multiphotonen-Konfokal-Laser-Scanning-Mikroskop wird in verschiedenen Forschungs- und Anwendungsbereichen eingesetzt. Es ermöglicht eine dreidimensionale zerstörungsfreie Betrachtung von Proben in ihrem natürlichen Zustand und kann die Auflösung und das Signal-Rausch-Verhältnis des Systems verbessern. Durch die Änderung der Materialeigenschaften nach der Multiphotonen-Anregung ist es außerdem möglich, dreidimensionale Höhendaten zu speichern und dreidimensionale Mikrofabrikation in jede Richtung zu erreichen, was einen hohen Anwendungswert hat. Es ist davon auszugehen, dass sich das Multiphotonen-Konfokal-Laser-Scanning-Mikroskop mit der Weiterentwicklung von Maschinen, Materialien, Lasertechnologie und anderen Technologien im Zusammenhang mit der Multiphotonen-Konfokalmikroskopie weiter entwickeln und breitere Anwendung finden wird.
Nachteile sind wie folgt:
1, nur Fluoreszenzbildgebung.
2, wenn die Probe Chromophore enthält, die das Anregungslicht absorbieren können, wie zum BeispielPigmente, die Probekann durch Hitze beschädigt werden.
3, die Auflösung ist leicht reduziert, ObwohlSie kann durch die gleichzeitige Verwendung konfokaler Blenden verbessert werden, Aberes kommt zu Signalverlust.
4. Die Kosten der Multiphotonen-Rastermikroskopie sind aufgrund der Beschränkungen teurer ultraschneller Laser hoch.
