Verfahren zur Herstellung von Objektträgern
Es gibt drei Methoden zur Herstellung von Objektträgern:
1. Abstrichmethode
Bei der Ausstrichmethode handelt es sich um eine Präparationsmethode, bei der das Material gleichmäßig auf dem Objektträger verteilt wird.
Zu den Ausstrichmaterialien zählen Einzeller, kleine Algen, Blut, Bakterienkulturen, lose Gewebe von Pflanzen und Tieren, Spermiennester, Staubbeutel usw.
Beim Einschmieren ist zu beachten:
(1) Der Objektträger muss sauber sein.
(2) Der Objektträger sollte flach gehalten werden.
3) Die Beschichtung muss gleichmäßig sein. Tragen Sie den Tropfen Beschichtungsflüssigkeit rechts von der Mitte des Objektträgers auf und verteilen Sie ihn gut mit der Klinge eines Präpariermessers oder einem Zahnstocher o. Ä.
4) Die Beschichtung sollte dünn sein. Verwenden Sie einen anderen Objektträger als Schieber, schieben Sie mit dem Tropfen der Anwendungslösung vorsichtig von rechts nach links entlang der Oberfläche des Objektträgers (der Winkel zwischen den beiden Objektträgern sollte 30 bis 45 Grad betragen) und tragen Sie eine gleichmäßig dünne Schicht auf.
5) Fixierung. Wenn eine Fixierung erforderlich ist, verwenden Sie ein chemisches Fixiermittel oder eine Trockenfixierung (bakterielle Fixierung).
6) Färben. Verwenden Sie Methylenblau für Bakterien und Rachels Färbemittel für Blut. Die Färbelösung sollte die gesamte beschichtete Oberfläche bedecken.
7) Abspülen. Auf saugfähigem Papier aufsaugen oder trocken backen.
8) Versiegeln Sie die Folie. Verwenden Sie für die Langzeitlagerung kanadische Baumfolie.
2. Filmpressverfahren
Bei der Druckfolienmethode wird das biologische Material zwischen Objektträger und Deckfolie gelegt und durch Ausüben eines bestimmten Drucks werden die Gewebezellen auseinandergedrückt eine Präparationsmethode.
(1) Material entnehmen. Bei der Zellteilung sollten bei der Zellteilung üppige, frische Gewebezellen als Material ausgewählt werden. Zum Beispiel Wurzelspitzen, Meristemgewebe an der Stängelspitze, Knochenmarkszellen, Antheren (Pollenmutterzellen). Spermiennester (Spermatogonien) und so weiter.
(2) Fixierung. Die Fixierung des Materials kann je nach Bedarf bestimmt werden. Unmittelbar nach der Entnahme des Materials zur Druckfilmbeobachtung kann keine separate Fixierbehandlung (und gleichzeitige Färbung) durchgeführt werden. Wenn das Material nicht unmittelbar nach der Untersuchung entnommen wird, kann das Material mit einem Fixiermittel (im Allgemeinen mit einem Alkoholacetat-Fixiermittel) fixiert werden. Nach dem Waschen mit 95 % Ethanol wird das Material 2 bis 24 Stunden (je nach Material) fixiert und in 70 % Ethanol konserviert. Standby.
(3) Dissoziation. Die Zellen lassen sich nicht leicht mit einer Hydrolyse-Trennlösung (z. B. 1N HCl oder Salzsäure-Alkohol-Lösung) vom Material trennen. Die Behandlung dauert in der Regel 6 bis 20 Minuten. Nach der Dissoziation wird vor dem Färben mit Wasser gespült.
(4) Färbung. Es gibt viele Arten von Färbungen. Bei der Beobachtung von Chromosomen wird üblicherweise eine Magenta-Acetat-Färbelösung zum Färben verwendet.
(5) Andrücken des Films. Legen Sie das Material auf einen Objektträger, geben Sie einen Tropfen Wasser oder Färbelösung hinzu, decken Sie den Objektträger mit dem Deckglas ab und drücken Sie den Objektträger vorsichtig mit dem Daumen an.
(6) Beobachtung. Nach dem Andrücken des Films kann dieser unter dem Mikroskop beobachtet werden.
