Fluoreszenzmikroskope werden anhand ihres Strahlengangs in zwei Typen eingeteilt:
1. Transmissionsfluoreszenzmikroskop: Die Anregungslichtquelle wird verwendet, um Fluoreszenz anzuregen, indem sie durch eine Kondensorlinse durch das Probenmaterial dringt. Es können auch häufig verwendete Dunkelfeldkonzentratoren verwendet werden, und gewöhnliche Konzentratoren können verwendet werden, um den Reflektor so einzustellen, dass er das Anregungslicht umlenkt und seitlich auf die Probe strahlt. Dies ist ein relativ altmodisches Fluoreszenzmikroskop. Sein Vorteil ist eine starke Fluoreszenz bei geringer Vergrößerung, sein Nachteil besteht jedoch darin, dass seine Fluoreszenz mit zunehmender Vergrößerung abnimmt. Daher eignet es sich besser für die Beobachtung größerer Probenmaterialien.
2. Das Falllicht-Fluoreszenzmikroskop ist eine neue Art von Fluoreszenzmikroskop, das in der Neuzeit entwickelt wurde. Im Gegensatz zu oben fällt das Anregungslicht von der Objektivlinse nach unten auf die Oberfläche der Probe, wobei dieselbe Objektivlinse als Beleuchtungskondensor und die Objektivlinse zum Sammeln der Fluoreszenz verwendet werden. Dem Strahlengang muss ein zweifarbiger Strahlteiler hinzugefügt werden, der 45 Grad vom Lichturan entfernt ist. Winkel wird das Anregungslicht in die Objektivlinse reflektiert und auf die Probe fokussiert. Die von der Probe erzeugte Fluoreszenz sowie das von der Oberfläche der Objektivlinse und des Deckglases reflektierte Anregungslicht gelangen in die Objektivlinse und kehren zum zweifarbigen Strahlteiler zurück, wodurch Anregungslicht und Fluoreszenz getrennt werden. Das restliche Anregungslicht wird dann vom Sperrfilter absorbiert. Wenn unterschiedliche Kombinationen von Anregungsfiltern/zweifarbigen Strahlteilern/Sperrfiltern verwendet werden, können diese den Anforderungen unterschiedlicher Fluoreszenzreaktionsprodukte gerecht werden. Die Vorteile dieses Fluoreszenzmikroskops sind eine gleichmäßige Feldausleuchtung, eine klare Abbildung und eine stärkere Fluoreszenz bei größerer Vergrößerung.
(2) Anweisungen zur Verwendung des Fluoreszenzmikroskops
1. Schalten Sie die Lichtquelle ein. Die Ultra-Quecksilberhochdrucklampe muss einige Minuten vorgeheizt werden, um ihre maximale Helligkeit zu erreichen.
2. Die Transmissionsfluoreszenzmikroskopie erfordert die Installation des erforderlichen Anregungsfilters zwischen Lampenquelle und Kondensor und des entsprechenden Sperrfilters hinter der Objektivlinse. Das Falllicht-Fluoreszenzmikroskop muss den erforderlichen Anregungsfilter/Zweifarbstrahlteiler/Blockfilterblock in den Schlitz des optischen Pfads einsetzen.
3. Beobachten Sie mit einem Mikroskop geringer Leistung und stellen Sie die Mitte der Lichtquelle entsprechend der Einstellvorrichtung verschiedener Arten von Fluoreszenzmikroskopen so ein, dass sie sich in der Mitte des gesamten Beleuchtungsflecks befindet.
4. Platzieren Sie die Probe und fokussieren Sie sie zur Beobachtung. Bei der Verwendung ist Folgendes zu beachten: Beobachten Sie vor der Installation des Filters nicht direkt mit den Augen, um Augenschäden zu vermeiden. Bei der Beobachtung von Proben mit einem Ölmikroskop muss ein spezielles nicht fluoreszierendes Ölmikroskop verwendet werden; Nachdem die Quecksilberhochdrucklampe ausgeschaltet wurde, kann sie nicht sofort wieder eingeschaltet werden. Der Neustart dauert 5 Minuten, da er sonst instabil wird und die Lebensdauer der Quecksilberlampe beeinträchtigt.
(3) Bei der Beobachtung unter einem Fluoreszenzmikroskop auf einer Lehrplattform unter Verwendung eines blauvioletten Lichtfilters sind mit 0,01 % Acridinorange-Fluoreszenzfarbstoff gefärbte Zellen zu sehen. Der Zellkern und das Zytoplasma werden angeregt, zwei verschiedene Fluoreszenzfarben zu erzeugen (dunkelgrün und orangerot).
