Dunkelfeldmikroskopie
Dunkelfeldmikroskopie
Ein Dunkelfeldmikroskop, auch Dunkelfeldmikroskop genannt, ist ein spezielles Mikroskop, das die Details einer Probe durch Beobachtung des Streulichts unterscheidet, das entsteht, wenn die Probe mit seitlichem Licht beleuchtet wird.
1. Das Prinzip und die strukturellen Eigenschaften eines Dunkelfeldmikroskops
Der Unterschied zwischen einem Dunkelfeldmikroskop und einem allgemeinen Hellfeldmikroskop liegt im Unterschied im Kondensor. Ein Dunkelfeldmikroskop ist mit einem zentralen abgedunkelten Kondensor ausgestattet, der verhindert, dass Licht durch den Kondensor dringt, und nur schräg von der Peripherie des Kondensors und dem nicht abgeschatteten Bereich zur Probe auf dem Objektträger gelangen kann. Da das Licht abgewinkelt ist und nicht in das Objektiv eindringen kann, ist das Sichtfeld für die Beobachtung dunkel. Das vom Kondensor auf das Myzel gerichtete Licht strahlt jedoch aufgrund der Lichtstreuung helles Licht ab, das in die Objektivlinse reflektiert wird. Auf diese Weise können helle Objekte im Dunkelfeld im Mikroskop gesehen werden.
Das Dunkelfeldmikroskop wird hauptsächlich zur Untersuchung der Morphologie und Motorik ungefärbter Präparate eingesetzt.
2. Betriebsmethode
① Verwenden Sie ein Forschungs-Dunkelfeldmikroskop oder entfernen Sie den Kondensor von einem normalen optischen Mikroskop und ersetzen Sie ihn durch einen Dunkelfeldkondensor.
② Unabhängig davon, ob ein Trockenobjektiv oder ein Ölobjektiv verwendet wird, sollte während der mikroskopischen Untersuchung ein großer Tropfen Teer auf die obere Linse des Kondensors gegeben werden.
③ Legen Sie den vorbereiteten Suspensionsprobenobjektträger auf den Tisch und heben Sie den Kondensator nach oben, damit das Öl mit dem Objektträger in Kontakt kommen kann.
④ Vergrößern Sie die Lichtquelle.
⑤ Passen Sie die optische Achse des Kondensors an und fokussieren Sie sie. Verwenden Sie ein 10-Objektiv, um das zu untersuchende Objekt zu lokalisieren, drehen Sie die Irisblende des Kondensors herunter, bis die Umrisse der Sichtfeldblende im Sichtfeld zu sehen sind, und verstellen Sie dann den Kondensor langsam nach oben und unten, um das zu erreichen Bild der Sichtfeldmembran klarer. Wenn sich die Sichtfeldblende nicht in der Mitte befindet, können Sie sie mit den beiden Einstellknöpfen an der Außenseite des Kondensors einstellen. Wenn der helle Fleck auf die Mitte des Feldes eingestellt ist, drehen Sie ihn zum Beobachten wieder auf.
3. Vorsichtsmaßnahmen
① Die numerische Apertur des für die Dunkelfeldbeobachtung verwendeten Objektivs sollte etwa 1,00-1,25 betragen. Wenn es zu hoch ist, ist die Wirkung möglicherweise nicht gut. Verwenden Sie am besten ein Objektiv mit Sichtfeldblende und drehen Sie den Einstellring in der Mitte des Tierobjektivs, um die Größe der numerischen Apertur frei zu ändern.
② Das benötigte Objektträger- und Deckglas muss kratz- und staubfrei sein, auch die Frontlinse des Objektivs muss sauber und staubfrei sein. Die Dicke des Objektträgers und des Deckglases sollte dem Standard entsprechen. Wenn der Objektträger zu dick ist, fällt der Fokus des Kondensors in den Objektträger und kann die Ebene des zu prüfenden Objekts nicht erreichen; Bei Verwendung einer Öllinse ist es aufgrund des kurzen Arbeitsabstands der Objektivlinse sogar unmöglich, zu fokussieren, was zur Folge hat, dass das zu prüfende Objekt nicht oder nicht klar erkennbar ist.
③ Während der Spiegelinspektion sollte der Raum dunkel sein. Liegen solche Bedingungen nicht vor, sollten so weit wie möglich Abschattungsvorrichtungen verwendet werden, um zu verhindern, dass Licht in den Bereich um das Okular eindringt.
④ Bei der Ölspiegelprüfung ist es aufgrund der diffusen Reflexion von Verunreinigungen und Blasen im Öl erforderlich, so viele Verunreinigungen und Blasen wie möglich aus dem Öl zu entfernen, da diese die Inspektionswirkung des Sichtfelds beeinträchtigen können
