Basierend auf ihren Lichtwegen gibt es zwei Arten von Fluoreszenzmikroskopen.
1. Transmissionsfluoreszenzmikroskop: Die Anregungslichtquelle durchdringt das Probenmaterial durch einen Kondensator, um die Fluoreszenz anzuregen. Normalerweise wird ein Dunkelfeldkollektor verwendet, oder es kann ein gewöhnlicher Kollektor verwendet werden, und der Reflektor wird so eingestellt, dass das Anregungslicht umgeleitet und seitlich auf die Probe gestrahlt wird. Dies ist ein älteres Fluoreszenzmikroskop. Der Vorteil besteht darin, dass die Fluoreszenz bei geringer Vergrößerung stark ist, der Nachteil jedoch darin, dass die Fluoreszenz mit zunehmender Vergrößerung schwächer wird. Daher ist es besser, größere Probenmaterialien zu beobachten.
2. Das Epifluoreszenzmikroskop ist ein neuer Typ von Fluoreszenzmikroskop, der in der modernen Zeit entwickelt wurde. Der Unterschied zum obigen besteht darin, dass das Anregungslicht von der Objektivlinse nach unten auf die Probenoberfläche fällt, d. h. dieselbe Objektivlinse wird als Beleuchtungskondensor und als Objektivlinse zum Sammeln der Fluoreszenz verwendet. Dem optischen Pfad muss ein Zweifarbenstrahlteiler hinzugefügt werden, der 45 % des optischen Urans beträgt. Winkel, das Anregungslicht wird in die Objektivlinse reflektiert und auf die Probe konzentriert. Die von der Probe erzeugte Fluoreszenz und das von der Objektivlinsenoberfläche und der Deckglasoberfläche reflektierte Anregungslicht treten gleichzeitig in die Objektivlinse ein und kehren zum dichromatischen Strahlteiler zurück, so dass das Anregungslicht von der Fluoreszenz getrennt wird. Das verbleibende Anregungslicht wird dann vom Sperrfilter absorbiert. Wenn Sie unterschiedliche Anregungsfilter/Zweifarbenstrahlteiler/Sperrfilter-Kombinationseinsätze verwenden, können Sie die Anforderungen verschiedener Fluoreszenzreaktionsprodukte erfüllen. Der Vorteil dieser Art von Fluoreszenzmikroskop besteht darin, dass das Sichtfeld gleichmäßig ausgeleuchtet ist, das Bild klar ist und die Fluoreszenz umso stärker ist, je stärker die Vergrößerung ist.
(2) So verwenden Sie ein Fluoreszenzmikroskop.
1. Schalten Sie die Lichtquelle ein. Die Quecksilberhochdrucklampe muss mehrere Minuten lang aufwärmen, um ihre hellste Helligkeit zu erreichen.
2. Bei Transmissionsfluoreszenzmikroskopen muss der erforderliche Anregungsfilter zwischen Lichtquelle und Kondensor und der entsprechende Sperrfilter hinter der Objektivlinse installiert werden. Bei Epifluoreszenzmikroskopen muss der erforderliche Anregungsfilter/Zweifarbstrahlteiler/Sperrfiltereinsatz in den Schlitz des Lichtwegs eingesetzt werden.
3. Verwenden Sie zur Beobachtung ein Mikroskop mit geringer Vergrößerung und stellen Sie den Mittelpunkt der Lichtquelle entsprechend den Einstellvorrichtungen verschiedener Modelle von Fluoreszenzmikroskopen so ein, dass er sich in der Mitte des gesamten Beleuchtungsflecks befindet.
4. Platzieren Sie das Probenstück und stellen Sie den Fokus zur Beobachtung ein. Bitte beachten Sie während des Gebrauchs: Beobachten Sie den Filter nicht direkt mit Ihren Augen, um Augenschäden zu vermeiden. Wenn Sie die Probe mit einer Öllinse beobachten, müssen Sie eine spezielle, nicht fluoreszierende Öllinse verwenden. Die Hochdruck-Quecksilberlampe kann nicht sofort nach dem Ausschalten wieder geöffnet werden. Sie kann nach 5 Minuten erneut gestartet werden, da sie sonst instabil wird und die Lebensdauer der Quecksilberlampe beeinträchtigt wird.
(3) Unter dem Fluoreszenzmikroskop auf der Lehrplattform mit einem blau-violetten Lichtfilter beobachten. Es ist zu erkennen, dass der Durchgang o ist. In mit 0,1 % Acridinorange fluoreszierendem Farbstoff gefärbten Zellen werden der Zellkern und das Zytoplasma angeregt, zwei verschiedene Fluoreszenzfarben (dunkelgrün und orangerot) zu erzeugen.
