Prinzipien und Merkmale der Dunkelfeldmikroskopie
Das Dunkelfeldmikroskop, auch Dunkelfeldmikroskop genannt, ist ein spezielles Mikroskop zum Unterscheiden von Probendetails durch Beobachtung des Streulichts, das entsteht, wenn die Proben von seitlichem Licht bestrahlt werden.
1. Das Prinzip und die strukturellen Eigenschaften des Dunkelfeldmikroskops
Der Unterschied zwischen Dunkelfeldmikroskopen und Hellfeldmikroskopen im Allgemeinen besteht in der Verdunkelung der beiden Konzentratoren. Das Dunkelfeldmikroskop ist mit einer zentralen Verdunkelung des Konzentrators ausgestattet, sodass das Licht nicht durch den Konzentrator hindurchgehen kann, sondern nur von den Rändern des Konzentrators und den nicht verdunkelten Teilen schräg auf die Probe auf dem Objektträger trifft. Da das Licht schräg ist, kann es nicht in die Objektivlinse eindringen, sodass das Sichtfeld der Beobachtung dunkel ist. Der Konzentrator lässt das Licht schräg auf die Bakterien treffen. Aufgrund des Lichtstreueffekts emittiert das Bakterium helles Licht, das zur Objektivlinse zurückreflektiert wird, sodass im dunklen Sichtfeld des Mikroskops das Bild des hellen Objekts sichtbar ist.
Das Dunkelfeldmikroskop wird hauptsächlich verwendet, um die Morphologie und Beweglichkeit ungefärbter Proben zu überprüfen.
2,Betriebsmethoden
①Verwenden Sie das Dunkelfeldmikroskop für die Forschung oder entfernen Sie den Kondensator am gewöhnlichen optischen Mikroskop und ersetzen Sie ihn durch den Dunkelfeldkondensator.
② Unabhängig davon, ob Sie ein Trockenobjektiv oder ein Ölimmersionsobjektiv verwenden, sollten Sie während der Mikroskopie einen großen Tropfen Zedernöl auf die obere Linse des Konzentrators geben.
③ Legen Sie die vorbereitete Scheibe der hängenden Tropfenprobe auf den Trägertisch und heben Sie den Konzentrator nach oben, um das Öl mit dem Objektträger in Kontakt zu bringen.
④ Vergrößern Sie die Lichtquelle.
⑤ Justieren und fokussieren Sie die optische Achse des Konzentrators. Suchen Sie mit einem 10-Zoll-Objektiv das zu untersuchende Objekt, schließen Sie die Irisblende des Konzentrators so, dass Sie im Sichtfeld den Umriss der Sichtfeldblende sehen können, und justieren Sie den Konzentrator dann langsam nach oben und unten, sodass das Bild der Sichtfeldblende klarer wird, z. B. wenn sich die Sichtfeldblende nicht in der Mitte des Felds befindet. Wenn der helle Punkt auf die Mitte des Sichtfelds eingestellt ist, verwenden Sie die beiden Einstellknöpfe, um den Konzentrator außerhalb des Sichtfelds einzustellen, und öffnen Sie ihn dann. Dann können Sie die Beobachtung durchführen.
3,Vorsichtsmaßnahmen
① Bei der Dunkelfeldbeobachtung sollte der Blendenwert der Objektivlinse bei etwa 1,25 liegen. Ist dies zu hoch, ist die Wirkung nicht gut. * Es ist besser, eine Objektivlinse mit Sichtfeldblende zu verwenden. Durch Drehen des Einstellrings in der Mitte der Objektivlinse können Sie den Wert der Blendengröße ändern.
Die verwendeten Objektträger und Deckgläser müssen frei von Kratzern und Staub sein, und die Linse vor der Objektivlinse muss sauber und staubfrei sein. Die Dicke der Objektträger und Deckgläser muss dem Standard entsprechen. Wenn der Objektträger zu dick ist, fällt der Fokus des Konzentrators in den Objektträger und kann die Ebene des zu untersuchenden Objekts nicht erreichen. Bei Verwendung von Öllinsen ist der Arbeitsabstand der Objektivlinse sehr kurz und sie können nicht einmal fokussieren, sodass Sie das zu untersuchende Objekt nicht sehen oder nicht sehen können.
③ Während der mikroskopischen Untersuchung sollte der Raum dunkel sein. Ist dies nicht der Fall, sollte möglichst ein Lichtschutzgerät verwendet werden, um das Eindringen von Licht um das Okular herum zu verhindern.
④ Bei der Ölspiegelprüfung wird das Sichtfeld des Spiegeleffekts durch die diffuse Reflexion der Verunreinigungen und Blasen im Öl behindert. Daher ist es erforderlich, die Verunreinigungen und Blasen im Öl so weit wie möglich zu beseitigen.
