Wie wählt man zwischen einem inversen Mikroskop und einem Fluoreszenzmikroskop?
In der Zellkultur und damit verbundenen Derivatexperimenten ist das Mikroskop ein sehr wichtiges Instrument. Derzeit gibt es verschiedene Arten von Mikroskopen auf dem Markt. Es ist eine Herausforderung, ein Mikroskop auszuwählen, das den Anforderungen entspricht und anwendbar ist. Im Folgenden finden Sie eine Einführung in die Prinzipien von inversen Mikroskopen und Fluoreszenzmikroskopen, damit Sie eine einfache Auswahl treffen können.
Der Aufbau des inversen Mikroskops ist der gleiche wie der eines gewöhnlichen Mikroskops und besteht hauptsächlich aus drei Teilen: dem mechanischen Teil, dem Beleuchtungsteil und dem optischen Teil. Der Aufbau des inversen Mikroskops ist der gleiche wie der des gewöhnlichen aufrechten Mikroskops, mit der Ausnahme, dass die Objektivlinse und das Beleuchtungssystem umgekehrt sind, wobei sich ersteres unter dem Tisch und letzteres über dem Tisch befindet. Eine solche Struktur kann den effektiven Abstand zwischen dem Beleuchtungskonzentrationssystem und dem Tisch erheblich vergrößern, was für die Platzierung dickerer zu beobachtender Objekte wie Kulturschalen und Zellkulturflaschen praktisch ist (natürlich sind auch Glasobjektträger usw. erhältlich). , und gleichzeitig muss der Abstand zwischen Objektiv und Material Der Arbeitsabstand zwischen ihnen muss nicht sehr groß sein. Inverse Mikroskope werden zur Beobachtung von Mikroorganismen, Zellen, Bakterien, Gewebekulturen, Suspensionen, Sedimenten usw. in medizinischen und gesundheitlichen Einrichtungen, Hochschulen und Forschungsinstituten eingesetzt. Es kann den Prozess der Vermehrung und Teilung von Zellen, Bakterien usw. im Kulturmedium kontinuierlich beobachten und dabei Bilder jeglicher Form aufnehmen. Es wird häufig in der Zytologie, Parasitologie, Onkologie, Immunologie, Gentechnik, industriellen Mikrobiologie, Botanik und anderen Bereichen eingesetzt.
Mit der Fluoreszenzmikroskopie werden die Absorption und der Transport von Substanzen in Zellen, die Verteilung und Lokalisierung chemischer Substanzen usw. untersucht. Für das zu untersuchende Objekt gibt es zwei Möglichkeiten, Fluoreszenz zu erzeugen: Autofluoreszenz, die direkt nach der Bestrahlung mit ultraviolettem Licht Fluoreszenz emittiert Licht; Einige Substanzen in den Zellen, wie zum Beispiel Chlorophyll, erzeugen Autofluoreszenz, nachdem sie mit ultravioletten Strahlen bestrahlt wurden; Obwohl einige Substanzen selbst nicht fluoreszieren können, können sie nach Anfärbung mit fluoreszierenden Farbstoffen oder fluoreszierenden Antikörpern nach Bestrahlung mit ultravioletten Strahlen auch sekundäre Fluoreszenz abgeben. Das Fluoreszenzmikroskop verwendet eine Punktlichtquelle mit hoher Lichtausbeute, um Licht einer bestimmten Wellenlänge (ultraviolettes Licht 365 nm oder violett-blaues Licht 420 nm) als Anregungslicht durch das Filtersystem zu emittieren und nach Anregung der fluoreszierenden Substanzen in der Probe verschiedene Fluoreszenzen zu emittieren Farben, dann erfolgt die Beobachtung durch die Vergrößerung des Objektivs und des Okulars. Auf diese Weise ist es vor einem kontrastreichen Hintergrund selbst bei sehr schwacher Fluoreszenz leicht zu identifizieren und weist eine hohe Empfindlichkeit auf. Es wird hauptsächlich zur Erforschung der Zellstruktur und -funktion sowie der chemischen Zusammensetzung verwendet.
Fluoreszenzmikroskope werden in Transmissions- und Epi-Ejektions-Typen unterteilt, wobei ersteres primitiver und letzteres fortgeschrittener ist. Der Grundaufbau der beiden Arten von Fluoreszenzmikroskopen ist ähnlich, der Hauptunterschied besteht darin, dass das Anregungslicht des Transmissionstyps durch die Probe geht und die gesamte Probe Fluoreszenz erzeugt, die dann in die Objektivlinse gelangt. Je höher die Vergrößerung, desto schwächer ist die Fluoreszenz; Das Anregungslicht vom Epi-Emissionstyp wird auf die Oberfläche der Probe projiziert, die Oberfläche der Probe erzeugt Fluoreszenz und die Fluoreszenz tritt wieder in die Objektivlinse ein. Je höher die Vergrößerung, desto stärker ist die Fluoreszenz, die für Beobachtungen mit hoher Vergrößerung geeignet ist. Zu den Hauptkomponenten des Fluoreszenzmikroskops gehören eine Quecksilberlampen-Lichtquelle, eine Anregungsfilterplatte, ein dichroitischer Spiegel (Episodentyp), eine gepresste Filterplatte und ein Dunkelfeldkondensor (Transmissionstyp) usw. Darüber hinaus aufgrund der Aufgrund der starken Hitzeentwicklung von Quecksilberlampen sind die meisten Lampen zusätzlich mit wärmeabsorbierenden Filtern ausgestattet. Einige Fluoreszenzmikroskope verfügen zusätzlich über Phasenkontrastobjektive und Ringblenden, sodass Phasenkontrastbeobachtungen möglich sind. Es gibt auch Fluoreszenzmikroskope mit umgekehrter Struktur, andere umgekehrte Mikroskope usw.
Darüber hinaus können die oben genannten Mikroskope durch den Einbau eines CCD zu einem digitalen Mikroskop zusammengebaut werden, das das vom Mikroskop gesehene physische Bild durch Digital-Analog-Umwandlung in ein Bild auf einem Computer umwandelt. Daher können wir die Forschung im mikroskopischen Bereich von der herkömmlichen gewöhnlichen binokularen Beobachtung auf die Wiedergabe auf dem Display umstellen und so die Arbeitseffizienz verbessern.
