WProwadzenie do zalet i wad wielofotonowej mikroskopii skaningowej laserowej
Vorteile des Multiphoton -Laser -Scanmikroskops:
1. Durch rotes oder infrarotes Licht angeregte Lichtstreuung ist klein und die Streuung kleiner Partikel ist umgekehrt proportional zur vierten Leistung der Wellenlänge.
2. mehr verstreute Photonen aus dem Bildgebungsquerschnitt können ohne die Notwendigkeit von Stripplöchern gesammelt werden.
3. Pinholes können gestreutete Photonen nicht von defokusionierten oder fokalen Bereichen unterscheiden, und Multiphotons haben ein besseres Signal-Rausch-Verhältnis in der tiefen Bildgebung.
4. Das für die Anregung einzelne Photonen verwendete ultraviolette oder sichtbare Licht wird leicht von der Probe absorbiert und abgeschwächt, bevor der Strahl die Brennebene erreicht, was es schwierig macht, tiefe Schichten zu erregen.
5. In Bezug auf die Beobachtung der biologischen Mikroskopie besteht die erste Überlegung darin, den aktiven Zustand des Organismus selbst nicht zu beschädigen, die Zirkulation von Wasser, Ionenkonzentration, Sauerstoff und Nährstoffen aufrechtzuerhalten. Im Bereich der Lichtbeobachtung müssen sowohl die thermische als auch die Photonenenergie innerhalb der Bestrahlungsdosis und der Lichtenergie bleiben, die die Zellen nicht beschädigen.
6. Multiphoton -Mikroskopie hat viele Vorteile. In Bezug auf dreidimensionale Auflösung, Tiefeninvasion, Streueffizienz, Hintergrundlicht, Signal-Rausch-Verhältnis, Kontrolle usw. gibt es Eigenschaften, die frühere Lasermikroskope nicht besitzen oder nicht übertreffen können
Nachteile des Multiphoton -Laser -Scanmikroskops:
1. nur für die Fluoreszenzbildgebung.
2. Wenn die Probe Chromophore enthält, die Anregungslicht absorbieren können, kann die Probe thermischer Schäden ausgesetzt werden.
3. Die Auflösung ist geringfügig reduziert, obwohl sie verbessert werden kann, indem gleichzeitig konfokale kleine Löcher verwendet werden, es gibt einen Signalverlust.
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