Warum ist die Vergrößerung einer Öllinse größer als die einer gewöhnlichen Objektivlinse?
Gründe, warum Bakterien in mikrobiologischen Experimenten vor der Färbung fixiert werden müssen:
1: Tötet Zellen und macht den Farbstoff leicht färbbar.
Zweitens: Sorgen Sie dafür, dass die Bakterien am Objektträger haften bleiben und nicht so leicht durch Wasser abgewaschen werden.
Beim Fixieren langsam trocknen. Wenn Sie den Vorgang wirklich beschleunigen möchten, können Sie es einige Male in einiger Entfernung über der Flamme einer Alkohollampe trocknen. Trocknen Sie das Glas nicht so, dass es sich erhitzt, da dies sonst die bakterielle Lebensform zerstören kann.
Gram-Färbung und mikroskopische Beobachtung von Bakterien
Versuchsprinzip
Prinzip der Gram-Färbung: Die unterschiedlichen Reaktionen von Bakterien auf die Gram-Färbung sind auf die unterschiedliche Zusammensetzung und Struktur ihrer Zellwände zurückzuführen. Die Zellwand von Gram-positiven Bakterien besteht hauptsächlich aus einem Netzwerk aus Peptidoglykanen. Bei der Behandlung mit Ethanol wird die Porengröße der Netzwerkstruktur aufgrund von Dehydration kleiner und die Durchlässigkeit verringert, wodurch sich der Komplex aus Kristallviolett und Jod bildet. Die Substanz lässt sich nicht leicht eluieren und verbleibt in den Zellen. Nach Entfärbung und Gegenfärbung bleibt die blau-violette Farbe des Primärfarbstoffs erhalten. Die Peptidoglykanschicht der Zellwand von Gram-negativen Bakterien ist dünn und hat einen hohen Lipidgehalt. Daher werden während der Entfärbung die Lipide durch Ethanol (oder Aceton) aufgelöst und die Durchlässigkeit der Zellwand erhöht, wodurch der Kristallviolett-Jod-Komplex relativ leicht eluiert werden kann. Nach der Gegenfärbung mit Gegenfärbemittel werden die Zellen mit der roten Farbe des Gegenfärbemittels gefärbt. Prinzip der Mikroskopbildgebung: Moderne gewöhnliche optische Mikroskope verwenden zwei Linsensysteme, Okulare und Objektivlinsen, um Bilder zu vergrößern, weshalb sie oft als zusammengesetzte Mikroskope bezeichnet werden. Im optischen System eines Mikroskops ist die Leistung der Objektivlinse am kritischsten. Die Öllinse hat die größte Vergrößerung und ist für die mikrobiologische Forschung am wichtigsten. Der Hauptzweck des Hinzufügens von Tropfen Linsenöl zwischen Objektträger und Linse besteht darin, die Beleuchtungshelligkeit zu erhöhen und die Auflösung des Mikroskops zu verbessern. Die Verwendung von Öl anstelle von Luft als Lichtausbreitungsmedium verringert die Brechung oder Totalreflexion des Lichts und macht das beobachtete Bild klarer.
Suchen Sie unter einem Mikroskop mit geringer Vergrößerung nach den zu beobachtenden Bakterienkolonien (bewegen Sie den Objektträger weiter, wenn Sie einen roten Schatten spüren, halten Sie sofort an und passen Sie die Vergrößerung an; wenn es sich nicht um eine Kolonie handelt, schauen Sie weiter), heben Sie den Objektivtubus an und wechseln Sie dann zur Öllinse. Geben Sie einen Tropfen Zedernöl auf den Probenbereich und senken Sie den Objektivtubus vorsichtig mit dem Grobregler ab, sodass die Öllinse in das Linsenöl eintaucht und fast die Probe berührt. Heben Sie den Kondensor in die höchste Position und öffnen Sie die Blende. Heben Sie den Objektivtubus langsam mit dem Grobregler an, bis das Objektbild im Sichtfeld erscheint, und stellen Sie es mit dem Feinregler klar und scharf.
