Die Vorbereitungsmethode von Objektträgern
1. Abstrichmethode
Die Schmiermethode ist eine Methode zur Vorbereitung von Objektträgern durch gleichmäßiges Auftragen von Materialien auf diese.
Zu den Abstrichmaterialien gehören einzellige Organismen, kleine Algen, Blut, Bakterienkulturmedien, loses Gewebe von Tieren und Pflanzen, Hoden, Staubbeutel usw.
Beim Verschmieren ist zu beachten:
(1) Der Objektträger muss gereinigt werden.
(2) Der Glasobjektträger sollte flach sein.
(3) Die Beschichtung muss gleichmäßig sein. Tragen Sie den Tropfen in der Mitte rechts auf den Objektträger auf und verteilen Sie ihn gleichmäßig mit einer Präparierklinge oder einem Zahnstocher.
(4) Die Beschichtung sollte dünn sein. Verwenden Sie einen anderen Glasobjektträger als Objektträger, drücken Sie vorsichtig von rechts nach links entlang der Oberfläche des Glasobjektträgers mit der aufgetragenen Flüssigkeit (der Winkel zwischen den beiden Objektträgern sollte 30 Grad bis 45 Grad betragen) und tragen Sie eine gleichmäßige dünne Schicht auf.
(5) Behoben. Ist eine Fixierung erforderlich, können zur Fixierung chemische Fixiermittel oder Trocknungsmethoden (Bakterien) eingesetzt werden.
(6) Färbung. Bakterien verwenden Methylenblau und Blut verwendet Wright-Färbelösung. Die Färbelösung sollte die gesamte Beschichtungsoberfläche bedecken.
(7) Spülen. Verwenden Sie zum Aufsaugen oder Trocknen saugfähiges Papier.
(8) Versiegeln Sie die Folie. Langzeitkonservierung mit kanadischer Baumfolie.
2. Tablettenpressmethode
Bei der Kompressionsmethode handelt es sich um eine Methode zum Schneiden biologischer Materialien, indem man sie zwischen einen Glasobjektträger und eine Abdeckung legt und dabei einen bestimmten Druck ausübt, um Gewebezellen zu verteilen.
Der allgemeine Prozess der Tablettenpressmethode:
(1) Materialauswahl. Um die Zellteilung zu beobachten, sollten als Materialien frische Gewebezellen mit starker Zellteilung ausgewählt werden. Wie Wurzelspitze, Stängelspitzenmeristem, Knochenmarkszellen, Staubbeutel (Pollenmutterzellen). Spermiennester (Spermatozyten) etc.
(2) Behoben. Die Materialfixierung kann je nach Bedarf bestimmt werden, und die Probe sollte sofort komprimiert und beobachtet werden. Es ist nicht notwendig, eine separate Fixierungsbehandlung (synchron mit der Färbung) durchzuführen; Wenn das Material nicht unmittelbar nach der Probenahme untersucht wird, kann es mit einem Fixiermittel (meist Essigsäure-Alkohol-Fixiermittel) fixiert werden. Nach der Fixierung für 2–24 Stunden (je nach Material) mit 95 %igem Ethanol abspülen und zur späteren Verwendung in 70 %igem Ethanol aufbewahren.
(3) Trennung. Materialien, die von Zellen nicht leicht verteilt werden können, sollten 6–20 Minuten lang mit einer Hydrolyse-Trennlösung (z. B. 1 N HCl oder Salzsäure-Sperma) behandelt werden. Nach der Dissoziation sollten sie vor dem Färben mit Wasser gespült werden.
(4) Färbung. Es gibt viele Arten von Farbstoffen. Chromosomen werden üblicherweise mit Essigsäure-Magenta-Färbelösung gefärbt.
(5) Drücken Sie auf das Tablet. Legen Sie das Material auf einen Glasobjektträger, geben Sie einen Tropfen Wasser oder eine Farbstofflösung hinzu, bedecken Sie den Objektträger mit einer Abdeckung und drücken Sie vorsichtig mit dem Daumen darauf.
(6) Beobachten. Nach der Kompression kann es unter dem Mikroskop beobachtet werden.
