Der Unterschied zwischen Zwei-Photonen-Mikroskopie und konfokaler Lasermikroskopie
Bei einem konfokalen Lasermikroskop handelt es sich um eine Reihe von Beobachtungs-, Analyse- und Ausgabesystemen, die Laser als Lichtquelle verwenden, Fokussierungsprinzip und -gerät auf der Grundlage eines herkömmlichen optischen Mikroskops kombinieren und das beobachtete Objekt mithilfe eines Computers digital verarbeiten. Zu den Hauptsystemen gehören Laserlichtquellen, automatische Mikroskope, Scanmodule (einschließlich konfokaler optischer Pfadkanäle und Lochblenden, Scanspiegel, Detektoren), digitale Signalprozessoren, Computer und Bildausgabegeräte (Displays, Farbdrucker). Durch den Einsatz eines konfokalen Laser-Scanning-Mikroskops ist es möglich, eine Tomographie und Bildgebung der beobachteten Probe durchzuführen. Dadurch ist es möglich, die dreidimensionale räumliche Struktur von Zellen ohne Beschädigung zu beobachten und zu analysieren.
Gleichzeitig ist die konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie auch ein leistungsstarkes Werkzeug für die dynamische Beobachtung lebender Zellen, die Mehrfachimmunfluoreszenzmarkierung und die Ionenfluoreszenzmarkierung. Es analysiert die Essenz des Spektrums genau und unterscheidet Signale verschiedener Labels mit stark überlappenden Emissionsspektren.
Das Wichtigste ist, dass bei der mehrfarbigen Fluoreszenzfärbung der Einfluss des Fluoreszenzübersprechens vollständig eliminiert und gleichzeitig der Verlust des Fluoreszenzsignals der Probe minimiert werden kann. Das sind alles Dinge, die normale Spiegel nicht leisten können.
Das Brennweitenverhältnis zwischen Mikroskopobjektiv und Okular
Verschiedene Prinzipien
1. Fluoreszenzmikroskop: Es verwendet ultraviolettes Licht als Lichtquelle, um das zu testende Objekt zu beleuchten, wodurch es Fluoreszenz aussendet, und beobachtet dann die Form und Position des Objekts unter dem Mikroskop.
2. Konfokales Lasermikroskop: Auf der Grundlage der Fluoreszenzmikroskopie-Bildgebung wird ein Laserscangerät installiert, um Fluoreszenzsonden mit ultraviolettem oder sichtbarem Licht anzuregen.
Unterschiedliche Eigenschaften
1. Fluoreszenzmikroskop: Wird zur Untersuchung der Absorption, des Transports, der Verteilung und der Lokalisierung von Substanzen in Zellen verwendet. Einige Substanzen in Zellen, wie zum Beispiel Chlorophyll, können Fluoreszenz abgeben, nachdem sie ultravioletter Strahlung ausgesetzt wurden; Einige Substanzen selbst emittieren möglicherweise keine Fluoreszenz, können aber bei Anfärbung mit Fluoreszenzfarbstoffen oder fluoreszierenden Antikörpern auch unter ultravioletter Strahlung Fluoreszenz emittieren.
2. Konfokales Lasermikroskop: Verwendung eines Computers zur Bildverarbeitung, um Fluoreszenzbilder der inneren Mikrostruktur von Zellen oder Geweben zu erhalten und physiologische Signale wie Ca2+, pH-Wert, Membranpotential und Veränderungen in der Zellmorphologie zu beobachten auf subzellulärer Ebene.
