Einführung in die Vor- und Nachteile der Multiphotonen-Laser-Scanning-Mikroskopie
Vorteile des Multiphotonen-Laser-Scanning-Mikroskops:
1. Bei der Anregung mit rotem oder infrarotem Licht ist die Lichtstreuung gering und die Streuung kleiner Partikel ist umgekehrt proportional zur vierten Potenz der Wellenlänge.
2. Es ist kein Loch erforderlich, um mehr gestreute Photonen aus dem Abbildungsquerschnitt zu sammeln.
3. Das Loch kann nicht zwischen den gestreuten Photonen unterscheiden, die von der unscharfen Region oder dem Brennpunktbereich emittiert werden. Bei der Mehrphotonen-Tiefenbildgebung ist das Signal-Rausch-Verhältnis gut.
4. Bei der Einzelphotonenanregung wird ultraviolettes oder sichtbares Licht verwendet, damit der Strahl die Brennebene erreicht, bevor die Probe leicht absorbiert und gedämpft wird, und es ist nicht leicht, ihn tief anzuregen.
5. Bei der Beobachtung unter dem biologischen Mikroskop ist * die erste Überlegung, den aktiven Zustand des Organismus selbst nicht zu schädigen, Feuchtigkeit, Ionenkonzentration, Sauerstoff- und Nährstoffzirkulation aufrechtzuerhalten. Bei Lichtbeobachtungen müssen sowohl thermische als auch Photonenenergie in der Zelle verbleiben, ohne dass die Menge an Strahlung und Lichtenergie Schaden nimmt.
6. Das Mehrphotonenmikroskop hat viele Vorteile. Wie dreidimensionale Auflösung, Tiefeneindringung, Streuungseffizienz, Hintergrundlicht, Signal-Rausch-Verhältnis, Steuerung usw. haben die vorherigen Lasermikroskope nicht oder können nicht mit den Eigenschaften verglichen werden, die sie übertreffen.
Nachteile des Multiphotonen-Laser-Scanning-Mikroskops:
1, nur Fluoreszenzbildgebung.
2. Wenn die Probe Chromophore enthält, die das Anregungslicht absorbieren können, kann die Probe thermisch beschädigt werden.
3. Die Auflösung verringert sich geringfügig, sie kann zwar durch den Einsatz einer konfokalen Blende verbessert werden, gleichzeitig kommt es jedoch zu Signalverlusten.
4. Die Kosten der Multiphotonen-Rastermikroskopie sind aufgrund der Beschränkungen teurer ultraschneller Laser hoch.
