Grundlegende Bedienung des Fluoreszenzmikroskops
A. Schalten Sie das Licht im Raum aus und schalten Sie die Quecksilberlampe des Mikroskops ein.
B. Wählen Sie den entsprechenden Filter entsprechend dem von der Probe markierten Fluorescein aus.
C. Platzieren Sie die Probe und finden Sie ein geeignetes Sichtfeld.
D. Wenn Sie Bilder aufnehmen müssen, vergewissern Sie sich bitte, dass der Farbfilm in der Kamera installiert ist.
e. Schalten Sie das Selfie-Gerät ein und wählen Sie den manuellen Gang. Normalerweise liegt die Aufnahmegeschwindigkeit innerhalb von 0.5-10 Sekunden.
F. Schalten Sie nach dem Gebrauch den gesamten Strom aus und protokollieren Sie die Nutzung. Die
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3. Aufnahmemethode des Fluoreszenzbildes
Das vom Fluoreszenzmikroskop gesehene Fluoreszenzbild weist sowohl morphologische Eigenschaften als auch Fluoreszenzfarbe und -helligkeit auf. Bei der Beurteilung der Ergebnisse müssen beide Aspekte für eine umfassende Beurteilung kombiniert werden. Die Ergebnisse werden auf der Grundlage subjektiver Indikatoren, also der visuellen Beobachtung durch die Arbeiter, erfasst. Als allgemeine qualitative Beobachtung grundsätzlich zuverlässig. Mit der Entwicklung von Technologie und Wissenschaft werden objektive Indikatoren in unterschiedlichem Maße zur Aufzeichnung von Beurteilungsergebnissen verwendet, beispielsweise Zellspektrophotometer, Bildanalysatoren und andere Instrumente. Allerdings müssen die mit diesen Instrumenten erfassten Ergebnisse auch mit subjektiven Urteilen kombiniert werden. Die
Für die Aufnahme von Fluoreszenzbildern ist die Fluoreszenzmikroskopfotografie unbedingt erforderlich. Da die Fluoreszenz leicht verblasst und schwächer wird, ist es notwendig, die Ergebnisse in Echtzeit aufzuzeichnen. Die Methode ist grundsätzlich die gleiche wie bei der gewöhnlichen Mikrofotografie. Sie müssen lediglich einen lichtempfindlichen Hochgeschwindigkeitsfilm verwenden. Da ultraviolettes Licht einen starken Einfluss auf die Fluoreszenzlöschung hat, wie beispielsweise bei FITC-Markern, nimmt die Fluoreszenzhelligkeit um 50 Prozent ab, wenn es 30 Sekunden lang mit ultraviolettem Licht bestrahlt wird. Wenn die Belichtungsgeschwindigkeit zu langsam ist, kann daher kein Fluoreszenzbild aufgenommen werden. Allgemeine Forschungsfluoreszenzmikroskope verfügen über halbautomatische oder vollautomatische Mikrofotografiesystemgeräte. Die
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4. Vorsichtsmaßnahmen für die Verwendung der Fluoreszenzmikroskopie
A. Halten Sie sich strikt an die Anforderungen der Werksanweisungen des Fluoreszenzmikroskops und ändern Sie das Programm nicht nach Belieben. Die
B. Die Inspektion sollte in einem dunklen Raum durchgeführt werden. Nachdem Sie die Dunkelkammer betreten haben, schließen Sie die Stromversorgung an und zünden Sie die Ultrahochdruck-Quecksilberlampe 5-15 Minuten lang an. Nachdem das starke Licht der Lichtquelle stabil ist, gewöhnen sich die Augen vollständig an die Dunkelkammer und beginnen dann mit der Beobachtung der Probe. Die
C. Um eine Schädigung der Augen durch ultraviolette Strahlen zu vermeiden, tragen Sie beim Einstellen der Lichtquelle eine Schutzbrille. Die
D. Die Inspektionszeit beträgt jeweils vorzugsweise 1-2 Stunden. Wenn sie 90 Minuten überschreitet, nimmt die Lichtstärke der Ultrahochdruck-Quecksilberlampe allmählich ab und die Fluoreszenz wird schwächer; Nachdem die Probe 3-5 Minuten lang mit ultraviolettem Licht bestrahlt wurde, wird auch die Fluoreszenz deutlich abgeschwächt; daher sollte sie höchstens 2-3 Stunden nicht überschreiten. . Die
e. Die Lebensdauer der Lichtquelle des Fluoreszenzmikroskops ist begrenzt und die Proben sollten zentral überprüft werden, um Zeit zu sparen und die Lichtquelle zu schützen. Bei heißem Wetter sollten Ventilatoren hinzugefügt werden, um die Wärme abzuleiten, und die neuen Glühbirnen sollten ab Beginn ihrer Nutzungsdauer erfasst werden. Wenn Sie die Lampe wieder verwenden möchten, nachdem die Lampe erloschen ist, müssen Sie warten, bis die Glühbirne ausreichend abgekühlt ist, bevor Sie sie anzünden. Vermeiden Sie es, die Lichtquelle mehrmals täglich anzuzünden. Die
F. Beobachten Sie die Probe unmittelbar nach dem Färben, da die Fluoreszenz mit der Zeit allmählich schwächer wird. Wenn die Probe in einem Polyethylen-Plastikbeutel bei 4 Grad gelagert wird, kann die Zeit der Fluoreszenzabschwächung verzögert und das Verdunsten des Eindeckmittels verhindert werden. Die
G. Beurteilungsmaßstab für die Fluoreszenzhelligkeit: Sie wird im Allgemeinen in vier Stufen unterteilt, d. h. „-“ bedeutet, dass keine oder nur eine schwache Fluoreszenz zu sehen ist. „Plus“ bedeutet, dass nur deutlich sichtbare Fluoreszenz zu sehen war. „plus plus“ bedeutet, dass helle Fluoreszenz sichtbar ist. „plus plus plus“ bedeutet sichtbare helle Fluoreszenz.
