Vergleich zwischen konfokaler Mikroskopie und konventioneller optischer Mikroskopie
Das Mikroskop ist das wichtigste Werkzeug zur Beobachtung von Zellen. Je nach Lichtquelle kann es in zwei Kategorien unterteilt werden: optische Mikroskope und Elektronenmikroskope. Ersteres verwendet sichtbares Licht (Ultraviolettmikroskop verwendet ultraviolettes Licht) als Lichtquelle, während letzteres Elektronenstrahlen als Lichtquelle verwendet. Zu den optischen Mikroskopen gehören sowohl gewöhnliche optische Mikroskope als auch laserkonfokale Mikroskope.
Gewöhnliches optisches Mikroskop
Ein gewöhnliches biologisches Mikroskop besteht aus drei Teilen, nämlich: ① Beleuchtungssystem, einschließlich Lichtquelle und Kondensor; ② Das optische Verstärkungssystem, bestehend aus einem Objektiv und einem Okular, ist der Hauptkörper eines Mikroskops. Um sphärische und chromatische Aberrationen zu eliminieren, bestehen sowohl das Okular als auch das Objektiv aus komplexen Linsengruppen. Mechanische Vorrichtung, die zur Fixierung von Materialien und zur Erleichterung der Beobachtung dient.
Die Klarheit eines Mikroskopbildes hängt nicht nur von seiner Vergrößerung, sondern auch von seiner Auflösung ab. Unter Auflösung versteht man die Fähigkeit eines Mikroskops (oder eines menschlichen Auges in einer Entfernung von 25 cm vom Ziel), Objekte in kleinen Abständen zu unterscheiden. Die Höhe der Auflösung hängt von der Wellenlänge des Lichts, dem Aperturindex und dem Brechungsindex des Mediums ab. Er wird ausgedrückt als: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, wobei n=der Brechungsindex des Mediums ist; =Öffnungswinkel (der Winkel, in dem die Probe die Objektivöffnung öffnet), NA=numerische Apertur. Ist der Winkel des Spiegels immer kleiner als 180?, daher muss der Maximalwert von zui für sina/2 kleiner als 1 sein.
Der Brechungsindex von Glas, das bei der Herstellung optischer Linsen verwendet wird, beträgt 1,65-1,78, und je näher der Brechungsindex des verwendeten Mediums an dem von Glas liegt, desto besser. Bei trockenen Objektiven ist das Medium Luft und das Öffnungsverhältnis beträgt im Allgemeinen 0.05-0.95; Die Öllinse verwendet Zedernöl als Medium und das Öffnungsverhältnis kann nahe bei 1,5 liegen.
Die Wellenlänge von gewöhnlichem Licht beträgt {{0}}nm, daher beträgt die Auflösung des Mikroskops nicht weniger als 0,2 μm und die Auflösung des menschlichen Auges beträgt 0,2 mm. Daher beträgt die maximale Vergrößerung für die Mikroskopkonstruktion normalerweise das 1000-fache.
